《中華人民共和國藥典》2015年版收載了上千個藥品用色譜法進行純度檢查、定性鑒別或含量測定。色譜法是生命科學(xué)、材料科學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)領(lǐng)域的重要分析手段,在藥物分析中有著極為重要的地位。
色譜柱中固定不變的物質(zhì)是固定相,攜帶樣品向前流動的是流動相,色譜類型較多,從不同角度可以有不同的分類方法。
1、按流動相和固定相所處狀態(tài)分類:
流動相為氣體的稱為氣相色譜,流動相為液體的稱為液相色譜。固定相為固體的可分為氣固色譜(GSC)或液固色譜(LSC),固定相為液體的有氣液色譜(GLC)或液液色譜(LLC)。
2、按固定相的形態(tài)分類:
可分為柱色譜法、平面色譜法,如,紙色譜法、薄層色譜法等。
3、按分離過程的機制分類:
可分為分配色譜法、吸附色譜法、離子交換色譜法和空間排阻色譜法等類型,后兩者只存在于液相色譜中。
另外,還有其他分離機制的色譜方法,如,毛細管電泳法,根據(jù)組分的電泳速度差異而實現(xiàn)分離。
氣相色譜儀的維護保養(yǎng)
(1)嚴格說明書要求,進行規(guī)范操作,這是正確使用和科學(xué)保養(yǎng)儀器的前提。
(2)儀器應(yīng)該有良好的接地,使用穩(wěn)壓電源,避免外部電器的干擾。
(3)使用高純載氣,純凈的氫氣和壓縮空氣,盡量不用氧氣代替空氣。
(4)確保載氣、氫氣、空氣的流量和比例適當、匹配,一般指導(dǎo)流速以次為載氣30mL/min,氫氣30mL/min,空氣300mL/min,針對不同的儀器特點,可在此基礎(chǔ)上,上下做適當調(diào)整。
(5)經(jīng)常進行試漏檢查(包括進樣墊),確保整個流路系統(tǒng)不漏氣。
(6)氣源壓力過低,氣體流量不穩(wěn),應(yīng)及時更換新鋼瓶,保持氣源壓力充足、穩(wěn)定。
液氮罐品牌推薦:泰萊華頓液氮罐原XL-45,美國查特chart杜瓦瓶DC180MP,配上雙極減壓閥,可以保證穩(wěn)定起源壓力。
(7)新填充的色譜柱不能馬上使用還需要進行老化處理,避免固定液流失,產(chǎn)生噪音。
(8)注射器要經(jīng)常用溶劑(如丙酮)清洗。試驗結(jié)束后,立即清洗干凈,以免被樣品中的高沸點物質(zhì)污染。
(9)要盡量用磨口玻璃瓶作試劑容器。避免使用橡皮塞,因其可能造成樣品污染。如果使用橡皮塞,要包一層聚乙烯膜,以保護橡皮塞不被溶劑溶解。
(10)避免超負荷進樣(否則會造成多方面的不良后果)。對不經(jīng)稀釋直接進樣的液態(tài)樣品進樣體積可先試0.1uL(約100ug),然后再做適當調(diào)整。
(11)對于欠穩(wěn)定的農(nóng)藥、中間體,用溶劑稀釋后再進行分析,這樣可以減少樣品的分解。
(12)密封墊分一般密封墊和耐高溫密封墊,汽化室溫度超過300℃時用耐高溫密封墊,耐高溫密封墊的一面有一層膜,使用時帶膜的面朝下。
(13)保持檢測器的清潔、暢通。為此,檢測器溫度可設(shè)得高一些,并用乙醇、丙酮和金屬絲經(jīng)常清洗和疏通。
(14)保持氣化室的惰性和清潔,防止樣品的吸附,分解。每周應(yīng)檢查一次玻璃襯管,如污染,清洗烘干后再使用。
(15)要定期更換空氣泵,氫氣發(fā)生器的硅膠和活性碳。
(16)操作過程中,一定要先通載氣再加熱,以防損壞檢測器。
(17)在使用微量進樣器取樣時要注意不可將進樣器的針芯*拔出,以防壞進樣器。
(18)進樣口溫度一般應(yīng)高于柱溫30~50度。檢測器溫度不能低于進樣口溫度,否則會污染檢測器進樣口溫度應(yīng)高于柱溫的zui高值,同時化合物在此溫度下不分解
(19)含酸、堿、鹽、水、金屬離子的化合物不能分析,要經(jīng)過處理方可進行。
(20)進樣器所取樣品要避免帶有氣泡以保證進樣重現(xiàn)性。
(21)取樣前用溶劑反復(fù)洗針,再用要分析的樣品至少洗2~5次。
(22)儀器要定期空走程序升溫老化柱子,這樣會提高柱子的使用壽命和降低儀器污染。