第1部分:離心機(jī)的用途是什么?
離心機(jī)在各種實(shí)驗(yàn)室中用于根據(jù)密度分離流體,氣體或液體。在研究和臨床實(shí)驗(yàn)室中,離心機(jī)通常用于細(xì)胞,細(xì)胞器,病毒,蛋白質(zhì)和核酸的純化,在臨床環(huán)境中使用離心機(jī)的一個(gè)示例是用于分離全血成分。不同的測定需要血清或血漿,可通過離心獲得,通過在室溫下使全血樣品凝塊獲得血清。然后將樣品離心,剩下血清上清液,與血清不同,血漿是從沒有凝結(jié)的全血中獲得的,血漿中含有血清和凝血因子。為了獲得血漿,將全血樣品收集在用抗凝劑處理過的試管中。離心后,除去細(xì)胞并保留血漿上清液。
第2部分:離心機(jī)如何工作?
根據(jù)顆粒大小和密度,介質(zhì)的粘度以及轉(zhuǎn)子速度,使用離心機(jī)分離懸浮在液體中的顆粒,在溶液中,重力將導(dǎo)致密度高于溶劑的顆粒下沉,而密度低于溶劑的顆粒則漂浮到頂部。離心利用密度的微小差異來分離溶液中的顆粒,當(dāng)轉(zhuǎn)子繞中心軸旋轉(zhuǎn)時(shí),它會(huì)產(chǎn)生離心力,作用是將顆粒從旋轉(zhuǎn)軸上移開。如果離心力超過液體介質(zhì)的浮力和顆粒產(chǎn)生的摩擦力,顆粒將沉降。
離心機(jī)的轉(zhuǎn)子類型
有兩種非常常見的轉(zhuǎn)子設(shè)計(jì):固定角度和擺動(dòng)鏟斗。定角轉(zhuǎn)子設(shè)計(jì)用于將管子相對(duì)于垂直旋轉(zhuǎn)軸以固定角度(大約45°)固定在固定位置。離心會(huì)導(dǎo)致顆粒沿著管子的側(cè)面和底部沉淀。擺動(dòng)桶的設(shè)計(jì)使離心管從垂直的靜止位置擺動(dòng)出來,變得平行于水平。結(jié)果,沉積物將沿著管的底部形成,固定角度轉(zhuǎn)子是制粒應(yīng)用的理想選擇,可用于從懸浮液中清除顆粒并丟棄碎屑或回收顆粒,而旋斗式轉(zhuǎn)子用于低速分離大體積樣品并將樣品以速率-區(qū)域(密度)梯度分離。
第3部分:如何選擇離心機(jī)?
離心機(jī)可以根據(jù)大速度(以每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)(RPM)來衡量)進(jìn)行分類。低速離心機(jī)的速度范圍從0-7,500 RPM,一直到20,000 RPM或更高,對(duì)于各種程序,離心機(jī)轉(zhuǎn)子速度通常表示為RCF,以重力單位(x g)為單位。但是,許多離心機(jī)將速度顯示為每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)(RPM),因此必須進(jìn)行轉(zhuǎn)換以確保正確的實(shí)驗(yàn)條件。以下公式用于將RPM轉(zhuǎn)換為RCF,其中R是轉(zhuǎn)子半徑(cm),S是速度(RPM):g =(1.118 x 10 -5)RS 2 ,離心機(jī)有各種臺(tái)式或落地式型號(hào),落地式型號(hào)可提供更大的樣品容量,并可以實(shí)現(xiàn)較高的速度。超速離心機(jī)的大g力(相對(duì)離心力,RCF)超過70,000 x g,而常用于DNA或RNA分離的超速離心機(jī)則可達(dá)到1,000,000 x g。 對(duì)于大容量,低速應(yīng)用,可以使用達(dá)到約7000 x g的低速離心機(jī),臺(tái)式機(jī)型占地面積較小,而通用機(jī)型則是廣泛應(yīng)用的理想選擇。有許多臺(tái)式型號(hào)可用,包括高速,微量離心機(jī),臨床和細(xì)胞清洗機(jī)型號(hào)。臨床臺(tái)式模型和細(xì)胞清洗器通常以較低的速度運(yùn)行,并且適合于診斷應(yīng)用以及從紅細(xì)胞中清洗碎屑,選擇適合特定應(yīng)用的離心機(jī)至關(guān)重要。購買離心機(jī)時(shí),重要的是要考慮以下問題:
第4部分:使用離心機(jī)時(shí)應(yīng)采取哪些安全預(yù)防措施?
在操作使用之前,請(qǐng)務(wù)必確保DT5-2低速臺(tái)式自動(dòng)平衡離心機(jī)在堅(jiān)固的水平表面上,運(yùn)行不平衡的離心機(jī)可能會(huì)造成重大損壞,并傷害操作人員和其他實(shí)驗(yàn)室人員。每根管的總質(zhì)量應(yīng)盡可能接近-在很高的轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速下,這一點(diǎn)變得越來越重要。建議將質(zhì)量平衡到0.1克,并且重要的是平衡質(zhì)量而不是體積的試管。例如,不要平衡密度等于或小于等體積水的液體所組成的樣品。
轉(zhuǎn)子移動(dòng)時(shí)請(qǐng)勿打開蓋子,許多離心機(jī)都有“安全關(guān)閉”功能。但是,這只會(huì)停止對(duì)轉(zhuǎn)子的供電,轉(zhuǎn)子仍然會(huì)由于自身的慣性而旋轉(zhuǎn)一段時(shí)間,直到由于摩擦而減速至停止為止。如果離心機(jī)晃動(dòng)或搖動(dòng),請(qǐng)拔下塞子,輕微振動(dòng)是正?,F(xiàn)象,但是過多振動(dòng)可能會(huì)帶來危險(xiǎn)。首先,仔細(xì)檢查管道是否正確平衡。如果這樣做不能解決問題,請(qǐng)?jiān)谥圃焐袒蚪?jīng)銷商維修離心機(jī)之前,不要操作離心機(jī),在啟動(dòng)離心機(jī)之前,必須正確加載離心機(jī)。平衡離心機(jī)可防止對(duì)儀器的潛在損壞,并且對(duì)于安全操作至關(guān)重要,確保所有樣品管均已填充。如果需要使用其他試管進(jìn)行平衡,請(qǐng)?jiān)谠嚬苤醒b入水或密度與樣品相似的液體,并確保質(zhì)量平衡到0.1克,對(duì)于插入轉(zhuǎn)子中的每根管子,在其正對(duì)面增加一根重量相等的管子。這將確保重心保持在轉(zhuǎn)子的中心,將轉(zhuǎn)子旋轉(zhuǎn)90°,并添加彼此相對(duì)的另外兩個(gè)管。
第5部分:如何維護(hù)離心機(jī)?
離心機(jī)保養(yǎng)與維護(hù)只需幾個(gè)簡單的步驟即可使離心機(jī)正常運(yùn)行,并降低損壞或受傷的風(fēng)險(xiǎn),保持離心機(jī)正確潤滑。O形圈是防止樣品泄漏的主要保護(hù)手段,在安裝新的轉(zhuǎn)子之前或清潔后必須對(duì)其進(jìn)行潤滑。任何帶螺紋的組件也應(yīng)定期清潔并用認(rèn)可的油脂潤滑,以確保正常運(yùn)行并防止交叉穿線和腐蝕,確保所有用戶都知道如何正確操作離心機(jī),包括確保將鏟斗正確放置在其銷釘中,確保轉(zhuǎn)子中的平衡管,在規(guī)定的速度和大隔室質(zhì)量準(zhǔn)則內(nèi)操作轉(zhuǎn)子,并避免刮傷轉(zhuǎn)子,檢查關(guān)鍵部件,并尋找磨損跡象,包括刮擦或轉(zhuǎn)子上化學(xué)物質(zhì)暴露的影響,請(qǐng)密切注意噪音,振動(dòng),震動(dòng)或研磨,并在發(fā)生這種情況時(shí)立即停止本機(jī),定期用中性清潔溶液(酒精或酒精消毒劑)清潔離心機(jī),并用軟布擦拭轉(zhuǎn)子和附件。日常清潔應(yīng)包括離心機(jī)的內(nèi)部,轉(zhuǎn)子腔以及帶有電子組件(如觸摸屏和鍵盤)的表面,重要的是要注意與離心機(jī)一起使用的不同類型的樣品以及清潔溢出物所需的任何特定產(chǎn)品或規(guī)程。